نام فایل : زیست و ازمایشگاه مهندسی ژنتیک

فرمت : .pptx

تعداد صفحه/اسلاید : 27

حجم : 893 کیلوبایت

بنام خدا
زیست و آزمایشگاه سال چهارم
مهندسی ژنتیک
نام‌های دیگر: تکنولوژی زیستی، فناوری DNA نوترکیب، دست‌ورزی ژنی
تعریف: فرایند دست‌ورزی در ژن‌ها برای دستیابی به هدف‌های مختلف که از مهمترین آنها تولید ژن یا فرآورده آن به مقدار انبوه می‌باشد.
تاریخچة ابداع:
الفـ دانشمندان: استانلی کوهن، هربرت بایر
بـ- نوع آزمایش: وارد کردن ژن سازنده rRNA از نوعی قورباغه آفریقایی به DNA باکتری اشریشیاکلای
ج ـ نتیجه آزمایش: تولید اولین جانداری که از طریق مهندسی ژنتیک تغییر یافته بود  باکتری اشریشیاکلای
مراحل اساسی مهندسی ژنتیک

مرحله اول: برش دادن DNA
اهداف:
ـ برش دادن DNA حاوی ژن موردنظر در 2 نقطه برای آزادسازی ژن موردنظر (ژن خارجی)
ـ برش دادن DNA وکتور در یک نقطه برای ایجاد محلی مناسب برای قرارگیری ژن خارجی
ابزار مورد نیاز: آنزیم محدودکننده (نوعی نوکلئاز)
الف-تعریف: آنزیم باکتریایی که توالی خاصی از DNA به نام جایگاه تشخیص آنزیم را شناسایی می‌کند و DNA را در آن محل برش می‌دهد (پیوند فسفو دی استر بین نوکلئوتیدهای یک رشته از DNA را قطع می‌کند.)
ب-نمونه کار آنزیم: تولید قطعات کوتاه تک رشته‌ای DNA در هر دو انتها که با یکدیگر مکمل هستند.
(انتهای چسبنده) و می‌توانند به هم متصل شوند.
ج-ویژگی‌ جایگاه تشخیص: توالی دو رشته آن عکس یکدیگر است د-مثال: آنزیم محدودکننده ECORI
1-جایگاه تشخیص آنزیم: توالی نوکلئوتیدی
ـ شکست دو پیوند فسفو‌دی استر
ـ شکست پیوند هیدروژنی بین 4 جفت باز آلی
2-تعداد نوکلئوتیدهای جایگاه تشخیص: 6 جفت
3-محل ایجاد برش: بین نوکلئوتید A و G ¬ نوکلئوتیدهای پورینی
4-تعداد جایگاه تشخیص آنزیم روی DNA وکتور: 1 عدد
5-انتهای چسبنده تولید شده: AATT و TTAA (هر دو انتها دارای 4 نوکلئوتید منفرد)

مرحله دوم: تولید DNA نوترکیب
تعریف: تولید DNA از ترکیب دو DNA متفاوت (ژن خارجی و DNA وکتور)
ابزارها:
(a وکتور (حامل)
انواع:
الف) ویروس: آلوده‌سازی یوکاریوتی‌ها
ب) پلازمید (کروموزوم کمکی)
....